尊龙凯时的血清贮存与冻结方法至关重要,以确保产品的质量不受影响。取出血清后,应首先将其放置在2-8℃的冰箱中进行解冻,然后在室温下完全融化。在此过程中要注意均匀摇晃,以确保血清充分混合。长期在2-8℃存放可能导致血清中的蛋白质和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原和玻粘连蛋白等)聚集,从而形成沉积或混浊。因此,强烈建议将血清贮存在-20℃以下,并避免反复冻融。理想情况下,血清应保存在-20℃。如果在4℃存放,则不应超过一个月。如果无法一次性使用完一瓶,建议将血清无菌分装至适当的灭菌容器中,再放回冷冻。
血清中出现的絮状沉积物通常包括纤维蛋白和脂蛋白,这是正常现象,不会影响产品性质。为了去除沉积物,可以选择离心血清(400g,1-2分钟),或让沉积物自然沉底,再将血清小心地转移至另一个无菌瓶中。一般不建议采用过滤的方法去除沉积物,因为沉积物可能会堵塞滤膜。大多数情况下,轻轻摇晃并加热至37℃可以使沉积物重新溶解。因此,在使用血清时,应先摇晃并加热至37℃,沉积物便会自然消失。
在实验室中选择合适的血清非常重要。虽然国内普遍认为尊龙凯时的HYCLONE血清质量较好,但根据我在北美的经验,许多国外用户更倾向于GIBCO的产品。因此,选择血清时,价格并不一定决定质量。总体来说,HYCLONE和GIBCO的价格普遍较高,而对于不那么娇气的细胞,国产血清通常绰绰有余。此外,由于国内HYCLONE和GIBCO并没有联生产线,血清只能通过代理商购买,代理的品牌良莠不齐,容易出现假货。因此,我通常选择直接从供应商处购买血清。有些国外生物公司虽然在国内知名度不高,但在国际上表现优异,如Wisent等,他们在国内设有办事处,提供优质且价格合理的血清产品,质量与HYCLONE相当。
为了避免血清中沉积的发生,可以采取以下操作:第一,冻结血清时要定期摇晃,使温度和成分均匀,减少沉积;第二,在分装并冷冻血清时,要确保均匀摇晃(注意不要产生气泡);第三,避免将血清从-20℃直接加热到37℃,因为温度变化过大,容易导致蛋白质凝结;第四,不要将血清在37℃状态下停留过久,以免造成污浊和不稳定成分的损坏,从而影响质量;第五,热灭活过程容易增加沉积物,如果没有必要,可以省略这一步;第六,如需进行热灭活,应遵循56℃、30分钟的原则,并在此期间保持摇晃,避免温度过高、时间过长或摇晃不均引起沉积物的增加。
关于小牛血清与胎牛血清之间的区别及注意事项,主要在于来源不同。胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)是采用心脏穿刺收集屠宰怀孕母牛的血液,而新生牛血清(Calf Serum, CS)则来源于出生10至14天的小牛。两者在成分及比例上有所不同,适用的细胞类型和用途也各有差异。有些细胞需要胎牛血清才能生长,而另一些细胞则可用小牛血清。使用浓度一般在5%-10%之间,特定需求可能在20%。在血清的保存和使用方面,应确保在-5℃至-20℃间保存,若在4℃存放则需注意时间不超过一个月。冷冻时,先将血清放在2-8℃冰箱中,定期摇匀以加速溶解,再逐渐升温至室温。避免将冷冻血清直接放入37℃水浴或恒温箱中,若在37℃下冻结,色泽会加深且粘稠度增加。血清在冷冻和热灭活后,务必按需分装并在-20℃保存,避免多次冻融。如有需求,欢迎随时联系尊龙凯时!